【名称】 鸡新城疫血凝抑制试验抗原使用说明书

本抗原系用鸡新城疫病毒La Sota株接种SPF鸡胚培养，收获尿囊液，经离心后灭活制成。抗原的红细胞凝集效价不低于1:256。用于检测鸡新城疫的抗体。

【用法和判定】 

1  抗原工作液制备

1.1 抗原凝集价测定

使用96孔板按表1进行。用稀释液将抗原倍比稀释成不同倍数，加入1％鸡红细胞悬液，再加入等量的稀释液。将96孔微量板在振荡器上摇匀，在20～30℃条件下放置20～40分钟，当红细胞对照孔中的红细胞呈显著纽扣状时判定结果。使红细胞完全凝集的最高稀释度，作为判定终点。

1.2  抗原工作液配制及检验

1.2.1  4×HA抗原的配制：如抗原凝集价测定结果为1:256，4个血凝单位（即4×HA）＝256/4＝64（即1:64）。取31.5ml 稀释液，加抗原0.5ml，使最终浓度为1:64。

1.2.2  4×HA抗原的验证

将配制的1:64倍稀释的抗原液分别取0.5ml的量加入0.5ml 、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml和3.0ml的稀释液中，使最终稀释度为1:2、1:3、1:4、1:5、1:6和1:7。然后，从每一稀释度取液体0.025ml，加入1％鸡红细胞悬液0.025ml，再加入0.025ml 稀释液，混匀。将血凝板在室温下放置20～40分钟后，如配制的抗原液为4×HA，则1:4稀释度将给出完全凝集终点；如4×HA高于4个单位，可能1:5或1:6为终点；如果较低，可能1:2或1:3为终点。应根据检验结果做适当调整，使工作液确为4×HA。

2  血凝抑制试验（HI）

2.1  用稀释液将被检血清做2倍倍比稀释，加入含4×HA的抗原液，并设阴、阳性血清对照，充分振荡后，置20～30℃下作用30分钟；再加入1％鸡红细胞悬液，在20～30℃下放置20～40分钟，当红细胞对照孔中的红细胞呈显著纽扣状时判定结果。使红细胞凝集完全抑制的血清最高稀释度作为判定终点。

【注意事项】

1．试验应在20～30℃条件下进行，每次检测时应设阳性、阴性血清（稀释方法同被检血清）及红细胞对照。

2．工作浓度的抗原应现配现用，使用时抗原必须充分摇匀。

3．应将使用剂量的抗原无菌吸出，剩余抗原放回冰箱保存。

4．只用于检验鸡血清，不能用于鸡全血反应。

【规格】 抗原 2.0ml/瓶，20×稀释液 30ml/瓶。

【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为24个月。

【生产企业】  北京中海生物科技有限公司

              中海生物技术（枣庄）有限公司  

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仅在兽医指导下使用

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