配制培养基时的注意事项以及常见问题分析
日期:2023-10-25 | 中海生物技术文库 | 浏览:664 次
培养基在灭菌前,需进行加热溶解(含琼脂的培养基需煮沸4-6次至琼脂完全溶解),再进行分装灭菌(应不超过1000mL);
含琼脂培养基,若灭菌前未进行加热溶解,灭菌后需充分摇匀使用;
所有培养基不宜灭菌过度和长时间保温,特别是含糖量高的培养基,如沙氏葡萄糖琼脂,灭菌过度或保温时间过长易使葡萄糖发生焦化,灭菌后的培养基颜色会变深,pH会下降,此外还会使蛋白胨中的维生素分解,降低培养基的营养;
需另加添加剂的培养基通常在培养基冷却至50℃左右时加入,已加入添加剂的琼脂类培养基不可熔化再次使用;
配制好的培养基需及时灭菌,不可久置;
培养基不可重复灭菌;
琼脂培养基不可反复熔化使用;待用的琼脂培养基可置47-50℃水浴保温或50-60℃烘箱保温,一般不可超过4小时;
使用蒸馏水或纯化水配制。饮用水或自来水中由于含矿物盐离子,配制培养基会产生浑浊现象;
容器不易过满,容量至少应比培养基体积大20%。
(1)称量错误
(2)琼脂分布不均匀
(3)培养基pH不正确
(4)加热过度
(5)琼脂量不足
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