培养基配制的注意事项,步骤及原则 | 培养基的配制和灭菌方法
日期:2023-12-18 | 中海生物技术文库 | 浏览:758 次
培养基的配制步骤和注意事项如下:
步骤:
- 按培养基的配方称取各种药品。
- 将各种药品加水溶解,通常是加所需水量的一半。
- 若配固体培养基,按2%的用量称取琼脂,用水将琼脂浸湿一下,用手挤去琼脂中过多的水分,加入2的溶液中。
- 加热至琼脂全部溶解,并补足所需的全部水量。
- 用1mol NaOH和1mol HCl调节pH至要求值。
- 用分装器将培养基分装入试管或三角瓶中,塞上棉塞并包扎,灭菌后备用。
注意事项:
- 加热熔化琼脂时,要不断搅拌,以防糊底。
- 分装时不要让培养基沾染试管口或瓶口,以防培养过程中容易污染杂菌。
培养基的配制原则包括:
- 营养成分的配比:碳源和氮源的比例(C/N)要适当。
- 适宜的酸碱度(pH值):配制培养基时pH的调节。
- 渗透压:营养物质要有适合的浓度。
- 培养基不能反复高温灭菌。
- 称不溶性固形物时,应单独称,若量少的可以与无机盐一起称,但一定要混匀再分装。
- 一般情况下培养基用自来水配制。
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