禽流感（H9 亚型）血凝抑制试验抗原使用说明书
日期：2023-12-06 | 中海生物技术文库 | 浏览：630 次
【兽药名称】
通用名称：禽流感（H9 亚型）血凝抑制试验抗原
商品名称：无
英文名称：Avian Influenza Virus(H9 subtype) Antigen for
Blood Hemagglutination Inhibition Test
汉 语 拼 音 ： Qiuliugan(H9 yaxing)Xueningyizhishiyan
Kangyuan
【主要成分与含量】本抗原为灭活的禽流感（H9 亚型）病毒，
血凝效价≧1:128（即 2
7
）
【性状】为疏松团块。
【作用与用途】适用于血凝抑制试验检测禽流感（H9 亚型）病
毒抗体
【用法与判定】
1 材料
移液器及吸头、1/15mol/L PBS（pH 值 7.0-7.2）、96 孔微量血
凝板（V 型）、1%（V/V）鸡红细胞悬液、加样槽等。
2 试验操作
2.1 血凝试验（HA）
2.1.1 96 孔微量血凝板 1-12 孔加入 PBS0.025ml，取抗原 0.025ml
加入第 1 孔中，反复稀释 5～10 次混匀，从第 1 孔中取 0.025ml 加入第 2 孔，稀释混匀取 0.025ml 加入第 3 孔，依此倍比稀释至第 11 孔，
第 12 孔作为红细胞对照孔。每孔补加 PBS0.025ml，再加入 1%（V/V）
鸡红细胞悬液 0.025ml，血凝板震荡混匀，室温放置 15～40 分钟或
置 2～8℃40～60 分钟。
2.1.2 结果判定 将血凝板倾斜 60 度，当对照孔中的红细胞呈显
著流淌的泪滴状时判读结果。以使红细胞完全凝集的最高稀释度作为
血凝价。
2.2 血凝抑制试验（HI）
2.2.1 依据抗原 HA 血凝效价，配制 4 个血凝单位抗原（4HAU）。
举例:血凝效价为 1:128，即 128/4=32（即稀释倍数为 1:32）。取 PBS
9ml,加入抗原 1.0ml,（即成 1:10 稀释）震荡混匀取 1.0ml，加入
2.2mlPBS 中，使最终浓度为 1:32。对其血凝价进行回归检验校准后，
2～8℃存放待用。
2.2.2 96 孔微量血凝板 1-11 孔加入 PBS0.025ml，第 12 孔加入
PBS0.05ml，取待检血清 0.025ml 加入第 1 孔中，反复稀释 5～10 次
混匀，从第 1 孔中取 0.025ml 加入第 2 孔，稀释混匀取 0.025ml 加入
第3孔，依此倍比稀释至第10孔。取4HAU于1-11孔每孔加入0.025ml，
血凝板震荡混匀，37℃作用 20 分钟。再每孔加入 1%（V/V）鸡红细
胞悬液 0.025ml。第 11 孔为 4HAU 对照孔，第 12 孔为红细胞对照孔。
将血凝板震荡混匀，室温放置 15～40 分钟。
2.2.3 结果判定 将血凝板倾斜 60 度，若 4HAU 对照孔无红细胞
凝集，红细胞对照孔有红细胞凝集，且呈明显流淌的泪滴状时，试验成立，可判读结果。使红细胞凝集被完全抑制的血清最高稀释度判为
被检血清 HI 效价。
【注意事项】
1．倍比稀释时，吸液、吐液动作不应过快，防止污染其他孔及
取量不准确。
2．4HAU 应现用现配，使用时充分混匀。
3．使用 1%鸡红细胞悬液时，应轻摇混匀。
4．因环境温度不同，判定结果时，可依据对照孔情况，适当调
整作用时间。
5．设立阴、阳性血清对照，且当阴性对照血清 HI 效价≦1:4、
阳性对照血清 HI 效价与已知结果相比，误差≤1 个稀释度时，试验
方可成立。
6.抗原使用前需用无菌生理盐水复溶。
【规格】 2ml/瓶
【贮藏与有效期】 -15℃以下保存，有效期为 12 个月
【包装】 10 瓶/盒
仅供兽医诊断使用
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