在使用微生物培养基过程中，发现一些技术人员对培养基使用存在偏差。中海生物技术zhzbio.com微生物培养基使用中常遇到的问题解答与大家分享和讨论常见。

问题一：高压灭菌是在培养基煮沸溶解后顺序？ 

解答：以中海麦康凯琼脂培养基为例：溶解灭菌后，盘子上无不溶性结晶紫、无紫色斑；与未溶解和消毒的盘子相比，盘子上有结晶紫和紫色斑点。因此正确的步骤顺序是在高压灭菌前需要进行培养基煮沸溶解。 

问题二：培养基pH值不在标准范围内的问题？

解答：出现此类情况有很多原因，中海生物大致分为①厂家质量：出厂时pH不稳定。②灭菌问题：是蒸压过高或杀菌时间过长，导致葡萄糖焦化，因此，pH值降低。③存放周期：保存时间超过保质期或结块水的质量有问题。④水质问题：采用去离子水/蒸馏水/纯净水等，不要采用矿泉水和自来水。⑤存储温度：储存温度过高。⑥光线直射等六种原因，可逐一检查排除解决问题。

问题三：如何测定培养基的pH值？

解答：中'海对于不需要高压灭菌的培养基，先煮沸溶解后冷却至二十五度，确定pH值；对需要高压灭菌的介质取平均值，高压灭菌后冷却至二十五度，这两种状况测量培养基pH值，固体培养基至少检测两个点，取它们的平均值。

问题四：高压灭菌造成培养基结焦焦化问题？

解答：在实验过程中，检测人员发现在高压灭菌后的培养基有结焦焦化现象。中海微生物认为造成这种现象是：控制培养基在容器中不要超过百分之八十，避免填充过多。注意控制高压灭菌时间过长（115-116度）二十分钟即可，温度不超过121度，而且灭菌后的培养基在高温环境中不要长时间存放。以上原因都会导致培养基结焦焦化。

问题五：含琼脂的培养基有时在平板上不凝固或凝固不好问题？

解答：在此种情况下，中海生物技术建议：对于需要高压灭菌的培养基, 倒入平板前先摇一摇。主要是琼脂培养基的分子量比较大，在冷却过程中容易沉淀到底，造成琼脂不能均匀分布。对于无需高压灭菌的培养基，不能直接煮沸溶解后倒入平板、需要重复三至五次煮沸溶解过程，因一次无法保证琼脂完全溶解。

问题六：同一品牌不同批号的粉末颜色不一样问题？

解答：中.海分析可能有：微生物培养基成分中含有染料或指示剂；不同批次的粉状培养基含水量不同。一般要求≤6。含水量越高，颜色越深；研磨时间越长，颜色越深等三个原因。

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