无血清支原体培养基使用说明书-中海生物
日期：2023-12-07 | 中海生物技术文库 | 浏览：638 次
【产品名称】
中文名称：无血清支原体培养基
英文名称：Sera Free Mycoplasma Medium
汉语拼音：Wuxueqing Zhiyuanti Peiyangji
【性 状】 液体培养基为澄清，无杂质，呈玫瑰红色液体；固体培养基为淡黄色固体，
加热融化后无絮状物或沉淀；固体培养基辅助液恢复至室温后为橙色液体。
【作用与用途】 用于血清中支原体的检验。
【用法与判定】
1. 液体培养基 先放在室温半小时，然后置于常温水中轻轻摇动融化，待全部融化后
分装后使用。分装量为：小瓶 20ml/瓶，小管 1.8ml/支。
2. 固体培养基 先将固体培养基和辅助液放在室温半小时。将固体培养基塑料盖拧松
一点，微波炉或水浴融化。微波炉融化时使用中火，每次 1 分钟，待全部融化后使用。辅助
液置于常温水中轻轻摇动融化，待全部融化后使用。
当固体培养基温度降到 50℃左右时，,辅助液 37℃预热后缓慢贴壁加入，混合均匀后按
平皿规格加入适量培养基（例如直径 60mm 的平皿加入固体培养基 9ml）制成固体平板。
3. 检验 取 2ml 样品加入到小瓶中，0.2ml 样品加入到小管中，从小瓶中取液体，分别
移植到 2 支小管液体培养基（0.2ml/支）、2 付固体培养基（0.1~0.2ml/付），将小瓶与小管放
37℃培养，固体培养基放置 37℃、5%CO2 培养箱中培养。接种后第 5 日、第 10 日、第 15
日从小瓶中取培养物移植 2 支小管液体培养基（0.2ml/支）和 2 付固体平板（0.1~0.2ml/付）。
每日观察培养物颜色有无变黄或变紫红的现象，若无变化，在最后 1 次移植培养 14 日后停
止观察。在观察期内，如小瓶或任何 1 支小管培养物颜色出现明显变化（pH 变化达±0.5）
时，应立即移植于 2 支小管液体培养基和 2 付固体平板进行培养，观察液体培养基是否出现
恒定的 pH 变化以及固体培养基有无支原体菌落生长。
每次检验时，均应同时设立阴、阳性对照。阳性对照为接种 1~10CFU/0.2ml 质控菌液
（猪鼻支原体 BTS-7 株）的小管液体培养基，和接种 1~50CFU/0.2ml 质控菌液的固体平板
培养基；阴性对照为接种灭菌生理盐水的小管液体培养基和固体平板培养基，同上法培养和
观察。
4. 结果判定
4.1 检测结果有效性 当阳性对照液体培养基出现颜色变黄，固体平板上出现支原体菌
落；阴性对照液体培养基不变色，固体平板上无支原体菌落时，检验有效，并作如下判定。
4.2 判定 若接种样品的小瓶或小管培养基出现颜色变黄，且固体平板上可见支原体菌
落，则判该样品有支原体污染。
【注意事项】
1. 培养基自低温环境取出，恢复到室温后使用。液体培养基和辅助液常温融化；固体
培养基可微波炉或水浴加热融化。
2. 制备固体平板时，固体培养基冷却至 50℃左右，,辅助液 37℃预热后缓慢贴壁加入，轻摇混匀，避免出现气泡。
3. 进行培养基灵敏度检验时的器皿，必须达到细胞培养的要求。
4. 如液体培养基出现浑浊或颜色变化，固体培养基平板表面干裂，应停止使用。
【规 格】 无血清支原体液体培养基 90ml/瓶；无血清支原体固体培养基 60ml/瓶；无血
清支原体固体培养基辅助液 13ml/瓶。
【贮藏与有效期】 无血清支原体液体培养基-20℃以下保存，有效期为 12 个月；无血清支
原体固体培养基 2~8℃保存，有效期为 12 个月；无血清支原体固体培养基辅助液-20℃以下
保存，有效期为 12 个月。
仅供兽医诊断使用
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