一、制备培养基溶液 

将所需量的水加到容器中，根据配方确定各种原料添加中海培养基以溶解它们，最后补足所需的水。对于蛋白胨，肉提取物和其他物质，需要加热使其溶解，在加热所有原料溶解后，在加热过程中蒸发的水应充满水。固体中海培养基配备，首先将上面制备的液体培养基煮沸，然后加入称重的琼脂，并继续加热直至其完全融化。并保持搅拌，以免灼伤琼脂糊的底部。 

二、调节培养基ph值  

使用pH试纸或pH电位计与氢离子浓度比色计测试培养基的pH值。  

三、过滤培养基 

使用滤纸，用纱布或棉布在热的情况下过滤准备好的培养基。用纱布过滤时，最好将其折叠成六层。用滤纸过滤时，将滤纸折叠成山脊形状，然后将其铺在漏斗上进行过滤。 

四、培养基分装 

应等分过滤后的介质。如果要制作倾斜的培养基，则必须将培养基分成试管。如果要制作平面培养基或液体或半固体培养基，则必须将培养基分配到锥形烧瓶中。 

分装中 海培养基时，需单手捏住弹簧夹，使培养基缓慢流出，并用另一只手握住几个试管或锥形瓶，依次取出中海 培养基。并请注意不要使中 海培养基粘附在试管或瓶子的嘴上，以免浸泡棉塞并造成细菌污染。培养基的量装入试管的量取决于试管和锥形瓶的尺寸和需求。 

通常在制作中海斜面培养基时，每个15×150 mm的试管约为试管高度的1/4至1/3的3~4 ml。对于深层培养基，每个20×220 mm试管约为12~15 ml。每个锥形烧瓶中包含的介质通常是其容量的一半。 

五、添加棉塞 

填充后，您需要塞住试管或瓶子的嘴用棉塞。堵塞的主要目的是过滤空气并避免污染。棉塞应由普通的新鲜干棉制成。请勿使用吸收棉，以免由于吸收棉而导致棉塞无法使用。中'海制作棉塞时，请根据棉塞的大小将棉布摊开至适当的厚度，握住您的手掌，然后将其放入由您的左手拇指和食指形成的圆形孔中用手，用右手食指插入棉布的中间，然后稍稍如果紧紧握住它，将形成一个长棒状的棉塞。棉塞制作完成后，应将其快速插入试管或瓶子的嘴中。棉塞应靠近内壁，且不留间隙，以防止空气中的微生物沿皱纹侵入。棉塞不应太紧或太松。塞好塞子后，塞子，试管和瓶子不要用手掉落。 三分之二的棉塞应放在试管或瓶中，顶部应露出一点棉布，以便于取出。装有棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸并用细绳捆扎，以便进行消毒。 

六、斜面培养基和平板培养基配制

进行培养基灭菌后，如果要制作斜面培养基zhzbio.com平板培养基，则必须花一些时间以使培养基不凝结。

 ①中海斜面培养基制作 

在测试台上放置长约半米至1米的木条，其厚度约壹厘米。将试管的头部放在木条上，使试管中的培养基自然倾斜，固化后试管中的培养基会倾斜。 

 ②中海平板培养基制作 

将装有刚刚灭菌过锥形瓶的中海培养基和培养器皿放在实验台上，点燃酒精灯，用右手握住锥形瓶底部，用左手拉出棉塞，并将瓶子的嘴放在酒精灯上。 

添加烧灼物，用左手打开培养皿的盖子，然后用右手将培养基迅速倒入培养皿中。将每个盘子倒入约十毫升，使其覆盖盘子的底部。 

放置介质后，使其静置约十五分钟。中.海培养基固化后，堆叠五个培养皿，将其倒置，然后将其平放在培养箱中。一天后检查。如果培养基末端有细菌，则可以使用。 

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